ФИСКА-САББАРОУ МЕТОД
Фиска-Саббароу метод (Фиске — Суббароу метод; С. H. Fiske, американский биохимик, род. в 1890 г., Y. Subbarow) — метод количественного определения неорганического фосфора в крови. Исследование содержания неорганического фосфора имеет большое диагностическое значение, особенно для диагностики в раннем детском возрасте рахита (см.), при к-ром отмечают гипофосфатемию (см. Фосфатемия). Повышение концентрации неорганического фосфора в крови (гиперфосфатемию) наблюдают при гипопаратиреозе (см.), акромегалии (см.), диабетическом кетозе (см. Диабет сахарный), лейкозах (см.), остром жировом гепатозе (см.), болезни Иценко — Кушинга (см. Иценко — Кушинга болезнь), миеломе (см. Миеломная болезнь), болезнях почек и др.
Принцип метода
В результате соединения неорганического фосфора с молибденовой к-той образуется фосфорно-молибденовая к-та, к-рая восстанавливается эйконогеном в молибденовый синий; интенсивность развившейся окраски пропорциональна количеству неорганического фосфора и может быть измерена колориметрически (см. Колориметрия).
Ход определения
Для осаждения белков к 2 мл крови приливают 8 мл 5 % р-ра трихлоруксусной к-ты и фильтруют. К 5 мл фильтрата прибавляют 1 мл 2,5% р-ра молибденовокислого аммония (25 г молибденовокислого аммония растворяют в 500 мл 0,1 н. р-ра серной к-ты и доводят водой до 1 л) и 0,4 мл р-ра эйконогена (14,25 г бисульфита натрия, 0,25 г аминонафтолсульфоновой к-ты и 10 мл 5% р-ра сернистокислого натрия доводят водой до 100 мл). К пробе добавляют воды до общего объема 10 мл. Для приготовления стандартного р-ра смешивают 0,1759 г двузамещенного фосфорнокислого калия и 10 мл 0,1 н. р-ра серной к-ты и доводят водой до 1 л. Стандартную пробу готовят, приливая к 5 мл стандартного р-ра 5 мл 2,5% р-ра молибденовокислого аммония и 2 мл эйконогена, и доводят объем до 50 мл. Концентрация фосфора в стандартной пробе равна 0,004 мг/мл.
Колориметрируют при длине волны 630—690 нм. (красный светофильтр) против холостой пробы, содержащей вместо безбелкового фильтрата 5 мл 5% р-ра трихлоруксусной к-ты. Рассчитывают содержание неорганического фосфора в крови в мг/мл, исходя из полученной экстинкции при колориметрировании опытной и стандартной проб:
Еоп • 0,004 • 10 / Ест,
где Еоп — зкстинкция опытной пробы, Eст — зкстинкция стандартной пробы, 0,004 — концентрация фосфора в стандартной пробе (мг/мл), 10 — разведение крови в опытной пробе.
Концентрация неорганического фосфора в плазме (сыворотке) крови при определении при помощи Фиска-Саббароу метода в норме составляет 3—5 мг/ 100 мл.
См. также Кровь, методы лабораторного исследования; Фосфор.
Библиогр.: Руководство по клиническим лабораторным исследованиям, под ред. Е. А. Кости Л. Г. Смирновой, с. 240, М., 1964; Fiske S. Ii. a. Subbаrоw Y. The colorimet ric determinal ion of phosphorus, J. biol. Chern., v. 66, p. 375, 1925.
Л. М. Пименова.