ИММУННОЕ ПРИЛИПАНИЕ
ИММУННОЕ ПРИЛИПАНИЕ (лат. immunis свободный, избавленный от чего-либо) — специфическая иммунологическая реакция, наступающая в результате образования комплекса антиген—антитело—комплемент и его взаимодействия с рецепторами тромбоцитов и эритроцитов и выражающаяся в образовании агглютинатов.
Впервые феномен прилипания тромбоцитов к бактериям обнаружил К. Левадити (1901), исследуя холерные вибрионы, введенные в кровь иммунизированных кроликов и морских свинок. Впоследствии этот феномен был подтвержден с различными микробами и воспроизведен in vitro [Эйно (М. Aynaud), 1911; Риккенберг (H. Rieckenberg), 1917; А. М. Брусин, 1925, и др.]. Явление прилипания тромбоцитов к бактериям, нагруженных антителами, детально изучено И. Л. Кричевским и сотр. (1924, 1927), доказавшими участие в этом процессе комплемента и специфических антител, названных ими тромбоцитобаринами. В 20— 30-х гг. феномен прилипания тромбоцитов называли реакцией Риккенберга—Брусина.
По аналогии с прилипанием тромбоцитов было описано явление прилипания эритроцитов человека к бактериям в присутствии специфических антител и комплемента. В 1953 г. Нельсон (D. S. Nelson) предложил термин «иммунное прилипание». Реакция И. п. характеризуется высокой чувствительностью и широко используется для определения in vitro активности разнообразных антител и антигенов, а также комплемента. Реакция И. п. протекает в 3 фазы: образование специфического комплекса антиген — антитело, присоединение комплемента к комплексу антиген — антитело, взаимодействие между комплексом антиген—антитело—комплемент и индикаторными клетками (тромбоциты, эритроциты). При постановке реакции И. п. все процедуры (отмывание, приготовление взвеси клеток, раз-ведение антисывороток и комплемента) проводят в вероналовом буферном р-ре (pH 7,2), содержащем ионы Ca и Mg. В качестве антигена используют: убитых бактерий, из которых после троекратного отмывания р-ром готовят взвесь в концентрации 2-108 клеток в 1 мл; различные типы соматических клеток животных и человека в виде клеточной суспензии (концентрация, напр., для лимфоцитов 5—6-106 клеток в 1 мл, для фибробластов 5 -105 клеток в 1 мл) или монослойных (изолированных) тканевых культур; яичный и сывороточный альбумины, бактериальные полисахариды и другие, из которых готовят 1% основной р-р, из к-рого последующим разведением готовят рабочие р-ры. Испытуемые антисыворотки (гетеро- и изоиммунные) предварительно инактивируют прогреванием в течение 30 мин. при t° 56° и освобождают путем адсорбции от гетерофильных антител к эритроцитам человека. В качестве комплемента применяют обычно смесь из свежих сывороток морских свинок, которые адсорбируют эритроцитами человека и соответствующими микробами. При определении антигенов HLA в лимфоидных и других клетках человека источником комплемента может быть сыворотка человека группы АВ. В качестве индикаторных клеток в основном используют эритроциты человека группы 0(I)Rh+, которые сохраняют в р-ре Альсевера до 3 нед. После трехкратного отмывания буферным р-ром готовят 1,5% взвесь.
Постановка реакции
В ряд пробирок типа Кана вносят по 0,2 мл испытуемой антисыворотки (в двухкратных разведениях), 0,5 мл антигена и 0,2 мл комплемента (разведение 1:10 — 1 : 50) и инкубируют в водяной бане в течение 30 мин. при t° 37°. Затем добавляют 0,1 мл 1,5% взвеси эритроцитов человека и снова инкубируют в течение 1—1,5 час. Результат реакции оценивают микроскопически путем подсчета процента эритроцитов, присоединившихся к корпускулярному антигену, сенсибилизированному антителами и комплементом, а также путем определения характера осадка эритроцитов, подобно тому как в реакции пассивной гемагглютинации.
Аналогичную постановку и учет результатов реакции проводят при использовании в качестве антигенов взвеси соматических клеток, при этом определяют также процент клеток с прилипшими эритроцитами (розетки). Реакцией считают, если прилипает не менее трех эритроцитов. Для определения трансплантационных антигенов системы HLA предложен микротест И. п., при к-ром все ингредиенты вносятся одновременно; результат оценивают по розеткообразованию (см. Иммунокомпетентные клетки).
Реакция И. п. характеризуется высокой специфичностью, она применяется для определения антигенных свойств бактерий, вирусов, лейкоцитов, клеток тканевых культур, а также активности растворимых антигенов, антител и комплемента.
Библиография: Брусин А. М. (Brussin) Eine neue Immunitatsreaktion bei experimentel-lem Riickfallfieber, Z. Immun.-Forsch., Bd 44, S. 328, 1925; КричевскийИ. Л. и Лебедева М. H. Исследование генетических отношений среди спирохет типа icterogenes (Leptospirae) при помощи тромбоцитобаринов, Труды Микробиол, науч.-исслед, ин-та, т. 3, с. 68, М., 1927; библиогр.; Кричевский И. Л. и Чериковер Р. 3. Об антителах, нагружающих микроорганизмы тромбоцитами (тромбоцитобарины), Журн, микр., патол, и инф. болезней, т. 1, в. 1-2, с. 348, 1924; Aynaud М. Action des microbes sur les globulins, С. R. Soc. Biol (Paris) t. 70, p. 54, 1911; Duke H. L. a. W a 1 1 a с e J. M. Red-cell adhesion in trypanosomiasis of man and animals, Parasitology, v. 22, p. 414, 1930; L e v a d i-t i G. Sur l’etat de la cytase dans le plasma des animaux normaux et des organismes vaccines contre le vibrion chol£rique, Ann. Inst, Pasteur, t. 15, p. 894, 1901; Nelson R.A. Immune-adherence phenomenon, immunologically specific reaction between microorganisms and erythrocytes leading to enhanced phagocytosis, Science, v. 118, p. 733, 1953; R i e с k e n-b e r g H. Eine neue Immunitatsreaktion bei experimenteller Trynanosomen-Infektion, die Blutplattchenprobe, Z. Immun.-Forsch., Bd 26, S. 53, 1917.
М. М. Капичников.